Thin-layer chromatography: mga simpleng pamamaraan para sa kumplikadong pagsusuri

2025 May -akda: Howard Calhoun | [email protected]. Huling binago: 2025-01-24 13:26

Ang Thin-layer chromatography ay sumasakop sa isang nangungunang posisyon sa quantitative at semi-quantitative analysis ng kumplikadong pharmaceutical, natural, biomedical, technological, chemical at marami pang ibang substance. Ang thin layer chromatography din ang pinaka-naa-access na paraan para sa mass analysis ng halos anumang klase ng substance.

Ang pamamaraang ito ng paghihiwalay at pagsusuri ng mga multicomponent system ay malawakang ginagamit sa mga laboratoryo ng iba't ibang mga detalye at direksyon: sanitary at epidemiological, beterinaryo, agrochemical, pananaliksik, forensic, gayundin sa mga istasyon ng proteksyon ng halaman, sa mga standardization center at bureaus ng forensic medical expertise.

Ang pangunahing bentahe ng thin layer chromatography batay sa paggalaw ng eluent (solvent of the analyte) sa sorbent layer dahil sa tinatawag na capillary forces,ay ang pagiging simple at kadalian ng proseso ng chromatographic, ang mataas na antas ng katumpakan ng pagsusuri at ang medyo mababang halaga ng mga kinakailangang kagamitan.

Ang Thin-layer chromatography, na may mataas na antas ng sensitivity (mababang detection threshold) at selectivity, ay nagbibigay-daan sa iyong matukoy ang 10-20 μg ng mga substance na may katumpakan na hanggang 7%, na isang napakataas na indicator. Ang thin layer chromatography ay maaaring may mga uri ng adsorption at distribution. Ang unang opsyon ang pinakamalawak na ginagamit.

Ang esensya ng thin-layer chromatography method ay ang paggalaw ng solvent ng substance sa sorbent layer at ang spatial distribution ng iba't ibang bahagi depende sa kanilang mga indibidwal na katangian at katangian. Ang katotohanan ay ang mga molekula ng iba't ibang komposisyon at istraktura ay sorbed (deposited) sa solid na ibabaw ng isang chromatographic plate sa iba't ibang paraan. Samakatuwid, ang mga kumplikadong multicomponent system ay unti-unting nahahati sa magkakahiwalay na bahagi.

Paglipat sa iba't ibang bilis sa kahabaan ng sorbent layer, hiwalay, hiwalay na, ang mga bahagi ay bumubuo ng chromatogram. Ang bawat lugar ng kulay ay tumutugma sa isang tiyak na kemikal. Kasabay nito, ang mga walang kulay na substance ay pinaiilaw ng ultraviolet light, sa ilalim ng impluwensya kung saan maraming mga compound ang nagsisimulang mag-fluoresce, o ang mga ito ay ginagamot ng isang espesyal na pangkulay na reagent.

Sa mga modernong pamamaraan ng analytical, namumukod-tangi ang gas-liquid chromatography. Ang paraan ng paghihiwalay at pagsusuri na itoay nailalarawan sa pamamagitan ng paggamit ng isang espesyal na non-volatile na likido bilang isang sorbent, na binabasa ang pulbos na ceramic na materyal. At iba't ibang mga inert gas ang ginagamit dito bilang isang daluyan ng pagmamaneho. Ang paraang ito ay pinakaepektibo para sa pag-aaral ng mga kumplikadong mixture na naglalaman ng daan-daang iba't ibang bahagi.

Ang isa pang modernong paraan para sa pag-aaral ng komposisyon ng mga kumplikadong sangkap ay ang liquid chromatography. Ang pangunahing tampok ng pamamaraang ito ay ang paghihiwalay ng mga indibidwal na bahagi sa pamamagitan ng paggamit ng mga pagkakaiba sa kanilang pamamahagi sa pagitan ng mga mobile (eluent) at nakatigil (sorbent) na mga phase. Ang pamamaraang ito ay kadalasang ginagamit sa pagsusuri ng iba't ibang mga organikong compound (mga additives ng pagkain, pestisidyo, iba't ibang mga lason, atbp.). Gayundin, ang pamamaraang ito ng chromatographic na pananaliksik ay ginagamit upang makontrol ang kalidad ng mga paghahanda sa parmasyutiko, matukoy ang nilalaman ng mga steroid sa mga biological fluid, pagsusuri ng amino acid at iba pang mga bagay.